抗体选择心得（原创）

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抗体选择心得（原创）

seabird

有爱就有希望
医博园版主

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2008-01-19 23:49

抗体选择心得（原创）
1、  抗体选择是不要用同种种属：如标本为鼠，不要用鼠源性的抗体。
2、  石蜡切片与冰冻切片的比较：冰冻切片抗原破坏小，但实验中不确定因素较多。目前石蜡切片可以有抗原修复，相对比以前好。
3、  单抗与多抗的问题：应用单抗特异性强，背景染色浅，应用多克隆抗体，特异性不够强，背景染色深，但有可能单抗出现假阴性，而多抗出现假阳性。

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番茄老人

医博园版主

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2008-01-21 01:02

我觉得有必要纠正一下：
1.抗体可以选择同一种属的，往往大家都想当然觉得不能选择同一种属，这是一种概念上的错误，抗体识别的是抗原上的抗原决定簇，并不是针对种属，没有种属特异性，同一种属来源抗体就用来做同一种属的样本或细胞，可以到各大公司的网站上查，鼠来源的抗体的适用范围很多也包括鼠，有些抗体是因为识别的多肽上人和鼠存在着差异，这时用人的多肽去免疫出来的抗体有时就不能识别鼠的。我也用鼠来源的抗体去做鼠和人的细胞都没问题，结果是一样的。一般一抗如果是鼠的，二抗就选择羊或兔抗鼠的，不会有鼠抗鼠的。
3.不能就因为是单克隆就可以认为特性强，多克隆就特异性弱，这跟抗体识别哪一肽段有关系，我们在做Western时有时单克隆会杂出非特异性带，也并不是多克隆抗体就会出现非特异性带，也有非常单一的。不管是Western还是免疫荧光/组化背景强除了跟抗体本人有关，还可以通过调整抗体的量来减少背景。具体问题具体分析。

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raul1999

医博园版主

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2008-01-22 18:35

学习了~~~~~抗体的选择

诚挚邀请各位来这里转转！ http://www.zhihuiyixue.com/bbs/post/page?bid=94&sty=1&age=30

• 【讨论】反复胸闷、气短10个月余,加重伴不能平卧4个月

hzauhy

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2008-08-15 20:15

3.单克隆抗体是由一个克隆产生的，针对同一抗原决定簇，所以特异性强，但也不完全如此，如果该决定簇在另一蛋白质分子中也存在，那么该抗体也会和其反应，所以说特异性只是相对与决定簇
而多抗则是由不同的B细胞分泌的，如果该蛋白有多个抗原决定簇，那么产生的抗体则可能是针对不同的抗原决定簇，所以其他蛋白只要存在任何一个相同的抗原决定簇，那么该多抗就可能与此蛋白产生交叉反应，相对的多抗的特异性就差一些，但是同样会有例外。

• 【活动】医考心路

homerchou

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2008-10-19 11:07

学习了先！好东西！

• 【转载】医生的职称是怎么制定的？

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