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封闭的原理
医园圣主



医博园版主

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2008-01-13 23:58会员属性给该会员发送悄悄话回复该帖子搜索该用户发表的帖子复制帖子内容收藏该帖子
今天老板问我蛋白是通过什么方式结合上去的?静电作用?范德华力,还是其他的作用方式?这个问题我以前也没有考虑过。

答:抗原和抗体的结合是互补性的特异性结合,不形成牢固的共价键,通过非共价键结合,这种弱的结合力涉及几种分子间的作用力
1.静电引力 抗原和抗体分子带有相反电荷的 氨基和羧基基团之间相互的引力。引力的大小与两个相互作用基团间的距离的平方成反比;平均键能约为20.9kJ/mo1。
2.范德华引力 抗原和抗体相互接近时,由于分子的极化作用而出现的引力。结合力的大小与两个相互作用基团的极化程度的乘积成正比、与它们之间距离的7次方成反比,键能约为4.2~12.5kJ/mol。这种引力的能量小于静电引力。 具有特异性。
3.氢键结合力 供氢体上的氢原子与受氢体原子间的引力。
供氢体:羧基、氨基和羟基
受氢体:羧基氧、羧基碳和肽键氧等
能的大小取决于氢键的方向:氢键具有高度的方向性。
氢键结合力与供氢体和受氢体之间距离的6次方成反比,键能约20.9kJ/mol。
4.疏水作用力 两个疏水基团在水溶液中相互接触时,由于对水分子排斥而趋向聚集的力。抗原决定簇与抗体上的结合点靠近,互相间正、负极性消失,亲水层立即失去。此力在抗原抗体反应中的结合是很重要的。提供的作用力最大,约占总结合力的50%。



【求助】paper
raul1999



医博园版主

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2008-01-20 22:43会员属性给该会员发送悄悄话回复该帖子搜索该用户发表的帖子复制帖子内容收藏该帖子
学习了·~~~~~
长知识啊·



诚挚邀请各位来这里转转! http://www.zhihuiyixue.com/bbs/post/page?bid=94&sty=1&age=30
【转载】医生的职称是怎么制定的?
zyl1999





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2008-01-21 16:41会员属性给该会员发送悄悄话回复该帖子搜索该用户发表的帖子复制帖子内容收藏该帖子
做WB转过膜以后,膜上除了你转过的蛋白外,其余地方也是可以结合蛋白的,如果不封闭,一抗孵育的时候就会有非常多的非特异性结合。这样可以出现非特异性结合背景。通常我们用脱脂奶粉封闭这些可能的结合位点,而脱脂奶粉中的蛋白一般是不与一抗或二抗反应的。


【公告】卫生部关于修订《医师资格考试暂行办法》第三十四条的通知
hzauhy





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2008-08-15 20:28会员属性给该会员发送悄悄话回复该帖子搜索该用户发表的帖子复制帖子内容收藏该帖子
虽然抗原抗体的结合是特异性的,但分子间也同样存在楼主所说的各种相互作用,所以在做Western或者Elisa时不单单要封闭,还要经过洗涤,去除非特异性结合的抗体,这样才能保证良好的本地


【讨论】检验海洋问候各位朋友了
biologyphd





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2009-01-01 11:12会员属性给该会员发送悄悄话回复该帖子搜索该用户发表的帖子复制帖子内容收藏该帖子
谢谢!


【试题】护师资格考试试题


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